Nel 2000 On the Road presenta il primo progetto art. 18 e diventa uno degli enti anti-tratta più significativi in Italia sviluppando i primi servizi specifici sulla tratta (lavoro di strada, drop in, accoglienza residenziale). Da qui in avanti On the Road, insieme ad altri partner territoriali, coordina e realizza progetti anti-tratta nelle Regioni Marche, Abruzzo e Molise, promuovendo negli anni diversi documenti e protocolli per il raccordo tra i soggetti che intervengono a favore delle vittime di tratta e per il contrasto del fenomeno criminale. Tra questi ricordiamo in particolare il Protocollo di indagine e identificazione delle vittime di tratta, elaborato congiuntamente e diramato nel settembre 2005 dalla Procura di Teramo a tutte le Forze dell’Ordine della Provincia.  

Inoltre, sempre nel 2000, On the Road apre la sua nuova sede in via delle Lancette a Martinsicuro, che rimarrà la sede principale fino al 2018.